分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室常用儀器使用方法與保養(yǎng)
分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室常用儀器使用方法與保養(yǎng)
分子生物學(xué)操作涉及一系列儀器。使用不當(dāng)會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗、降低儀器使用壽命或損壞儀器。因此,在操作前仔細(xì)了解各種儀器的使用方法和注意事項(xiàng),是使后續(xù)實(shí)驗(yàn)更加有效的必要準(zhǔn)備。
冷凍離心機(jī)
低溫分離技術(shù)是分子生物學(xué)研究中不可缺少的方法?;蚱蔚姆蛛x、酶蛋白的沉淀和回收,以及其他生物樣品的分離和制備都離不開低溫離心技術(shù)。因此,低溫離心機(jī)已成為分子生物學(xué)研究的重要工具。
如何使用:
1、離心機(jī)應(yīng)放置在水平、堅(jiān)固的地板或平臺(tái)上,盡量使機(jī)器處于水平位置,以免離心時(shí)機(jī)器振動(dòng)。
2、打開電源開關(guān),按要求安裝所需轉(zhuǎn)子,將用托盤天平預(yù)平衡的樣品放在轉(zhuǎn)子樣品架上(離心管必須與樣品同時(shí)平衡),蓋上蓋子.
3、按功能選擇鍵可設(shè)置各種要求:溫度、速度、時(shí)間、加減速。對(duì)于計(jì)算機(jī)控制的機(jī)器,您需要按保存按鈕來記憶輸入的信息。
4、按啟動(dòng)鍵,離心機(jī)將執(zhí)行上述參數(shù)運(yùn)行,并在預(yù)定時(shí)間自動(dòng)停機(jī)。
5. 離心機(jī)完全停止轉(zhuǎn)動(dòng)后,打開蓋子,取出離心后的樣品,用干凈的軟布擦拭轉(zhuǎn)子和離心腔內(nèi)壁,待離心腔內(nèi)溫度與離心腔溫度平衡后蓋上蓋子。室內(nèi)溫度。
筆記:
1、機(jī)體應(yīng)始終處于水平位置,外部供電系統(tǒng)的電壓要匹配,并需要良好的接地線。
2、開機(jī)前檢查轉(zhuǎn)子是否安裝牢固,機(jī)腔內(nèi)是否有異物。
3、樣品應(yīng)進(jìn)行預(yù)平衡,離心管用于離心時(shí),應(yīng)同時(shí)平衡離心管和樣品。
4、對(duì)揮發(fā)性或腐蝕性液體進(jìn)行離心時(shí),應(yīng)使用帶蓋的離心管,不得有液體外漏,以免腐蝕機(jī)腔或引起事故。
5、擦拭離心腔時(shí)要輕柔,以免損壞離心腔內(nèi)的溫度傳感器。
6、每次操作后,應(yīng)做好使用記錄,并定期檢查和維修機(jī)器性能。
7、離心過程中如發(fā)現(xiàn)異?,F(xiàn)象,應(yīng)立即關(guān)閉電源,并報(bào)告相關(guān)技術(shù)人員維修。
附錄:相對(duì)離心力與每分鐘轉(zhuǎn)速的換算
離心機(jī)的轉(zhuǎn)速在以往的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)中一般用每分鐘轉(zhuǎn)數(shù)表示。由于離心力不僅是速度的函數(shù),也是離心半徑的函數(shù),即當(dāng)速度相同時(shí),離心半徑越大,精神力越強(qiáng)。因此,僅用速度來表示離心力是不夠科學(xué)的。近年來,用相對(duì)離心力(RCF)來表示更為合理?,F(xiàn)在在國際數(shù)據(jù)中,已經(jīng)用相對(duì)離心力代替了。
數(shù)字pH計(jì):
一、準(zhǔn)備工作
1、儀器應(yīng)平放在適合使用環(huán)境的工作臺(tái)上,并按視角支撐好支架。
3、pH值定位測量方法:
(1)兩點(diǎn)定位法(高精度測量法)
(1) 連接電極線,將參比電極和活化超過24小時(shí)的干凈PH電極移入**個(gè)標(biāo)準(zhǔn)緩沖液pH1(例如pH1=4.00)中,待儀器響應(yīng)后穩(wěn)定,調(diào)節(jié)定位旋鈕,直到儀器顯示“0.00”;
(2)將電級(jí)系統(tǒng)從**標(biāo)準(zhǔn)溶液中取出使用 用離子水沖洗干凈后,用濾紙吸去電級(jí)表面的水分,然后轉(zhuǎn)移到第 二標(biāo)準(zhǔn)溶液中(例如, pH2=9.18)。待儀器響應(yīng)穩(wěn)定后,調(diào)節(jié)斜度旋鈕使儀器顯示(△pH=pH1-pH2=9.18-4.00=5.18)此后斜度旋鈕不能再移動(dòng),除非更換電極系統(tǒng);
(3)斜率調(diào)整完成后,重新調(diào)整定位旋鈕,使儀器顯示第 二標(biāo)準(zhǔn)溶液的實(shí)際pH值(9.18)。定位結(jié)束于 2 點(diǎn);
(4) 將電極從第 二個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液中取出,沖洗干凈,吸干,轉(zhuǎn)移到待測溶液中。儀器響應(yīng)穩(wěn)定后,顯示的值為待測溶液的pH值。
(2) 單點(diǎn)定位法(粗測法)
(1)調(diào)節(jié)溫度補(bǔ)償旋鈕至溶液溫度值;
(2) 將斜率補(bǔ)償旋鈕向左 旋到底;
(3) 接通電源 將液位系統(tǒng)移入標(biāo)準(zhǔn)溶液中(一點(diǎn)法只使用一種標(biāo)準(zhǔn)溶液,如pH=4.00),調(diào)節(jié)定位旋鈕使儀器顯示“4.00”;
(4)取出水平儀,沖洗吸水后移至待測溶液中,儀器響應(yīng)穩(wěn)定后顯示的數(shù)值即為待測溶液的pH值。
三、溫度測量
1. 將功能選擇設(shè)置為溫度文件。
2. 將溫度探頭插入插孔,將溫度探頭置于環(huán)境條件或溶液中。儀器響應(yīng)穩(wěn)定后,儀器顯示值為環(huán)境條件或溶液溫度值。
四。預(yù)防措施
1. 仔細(xì)使用儀器前的準(zhǔn)備工作。
2、儀器上電后或測量過程中,顯示不穩(wěn)定或亂跳,應(yīng)斷電檢查,如電壓、加熱時(shí)間和電極系統(tǒng)是否正常。
3、使用不同的電極時(shí),要注意排除離子的干擾,選擇好的鹽橋,必要時(shí)使用離子強(qiáng)度固定劑。
4、電極系統(tǒng)從**溶液中取出移入第 二溶液前,必須用去離子水或雙蒸水清洗干凈,然后用濾紙吸去表面水分,以免影響測量的準(zhǔn)確性結(jié)果。
5、儀器應(yīng)存放在干燥、清潔、無腐蝕的地方。每次測量后應(yīng)關(guān)閉電源,取出電極和溫度探頭并妥善保管。清洗干凈后,可將玻璃電極浸入去離子水中備用(注意水面不能低于玻璃泡)。清潔甘汞電極后,戴上橡膠帽,存放在配套的盒子中。當(dāng)甘汞電極漏液或未飽和及鹽橋中斷時(shí),應(yīng)及時(shí)補(bǔ)充飽和的內(nèi)部填充液。
6、該類儀表采用大規(guī)模集成電路,輸入電阻高。維修和焊接儀器內(nèi)部任何部件時(shí),應(yīng)使用45W以下接地線良好的烙鐵,不帶接地線的烙鐵應(yīng)與電源斷開。插頭是焊接的。
分光光度計(jì)
不同的物質(zhì)對(duì)不同波長的入射光有不同程度的吸收,從而形成特征吸收光譜。分光光度法不僅適用于可見光區(qū),還可以擴(kuò)展到紫外光區(qū)和紅外光區(qū),給科研實(shí)驗(yàn)帶來極大的方便。下面重點(diǎn)介紹分光光度計(jì)的使用和注意事項(xiàng)。
使用規(guī)則
1、打開穩(wěn)壓器電源,待穩(wěn)壓器輸出電壓穩(wěn)定到200V后打開光度計(jì)電源,儀器自動(dòng)進(jìn)入初始化。
2、初始化大約需要10分鐘,內(nèi)容包括: ①搜索零級(jí)光; ②建立基線; ③*后,當(dāng)顯示屏顯示××nm時(shí),表示儀器已完成初始化程序,可以進(jìn)入檢測狀態(tài)。
3. 根據(jù)需要輸入各種參數(shù),選擇相應(yīng)的比色皿(玻璃或石英),將空白管、標(biāo)準(zhǔn)管和待測管依次放入比色皿架中,蓋上比色皿蓋。
4. 空管自動(dòng)調(diào)零。
5、將樣品槽一一移動(dòng)到樣品位置,待數(shù)據(jù)顯示穩(wěn)定后,按“START/STOP”鍵,打印機(jī)將自動(dòng)打印測量數(shù)據(jù),重復(fù)上述步驟,直到所有樣品測試。
6、試驗(yàn)結(jié)束后,應(yīng)及時(shí)將比色皿取出,清洗干凈放回原處,同時(shí)關(guān)閉儀器電源開關(guān)和穩(wěn)壓器電源開關(guān),并登記使用情況.
預(yù)防措施
1、儀器**次使用或長期使用(一般為一年)時(shí),需要檢查波長精度,以保證測試結(jié)果的可靠性。
2、長途運(yùn)輸或室內(nèi)運(yùn)輸可能會(huì)造成光源位置偏移,導(dǎo)致亮電流漂移增大。此時(shí),調(diào)整光源位置,直至達(dá)到相關(guān)技術(shù)指標(biāo)。如果調(diào)整校正后波長精度、暗功率漂移和亮電流漂移三個(gè)關(guān)鍵指標(biāo)不符合要求,請(qǐng)停止使用并通知相關(guān)技術(shù)人員維修。
3. 每次測試后,檢查比色池中溶液是否溢出。如有溢出,請(qǐng)隨時(shí)用濾紙吸去,以免造成測量誤差或影響儀器使用壽命。
4、儀器每次使用時(shí),應(yīng)在燈室內(nèi)放幾袋硅膠(或其他干燥劑),防止反光罩受潮、發(fā)霉或沾染影響儀器使用,并蓋住燈罩。同時(shí)防塵。
5、儀器室平時(shí)應(yīng)保持清潔干燥。室溫為5-35℃,相對(duì)溫度不超過85%。有條件者,應(yīng)在房間內(nèi)配備空調(diào)和除濕機(jī),以保證儀器的穩(wěn)定性能。
6、儀器室內(nèi)不得存放酸、堿、揮發(fā)性或腐蝕性物質(zhì),以免損壞儀器。
7、儀器長期不使用時(shí),應(yīng)定期通電預(yù)熱,每周一次,每次30分鐘,以確保儀器良好使用。
電泳儀:
電泳技術(shù)是分子生物學(xué)研究不可或缺的重要分析方法。電泳一般分為自由界面電泳和區(qū)帶電泳兩大類。自由界面電泳不需要支持,如等電聚焦電泳、等速電泳、密度梯度電泳、微電泳等。這種類型的電泳目前很少使用。 .在區(qū)帶電泳中,需要各種類型的材料作為支持物。常用的支持物有濾紙、醋酸纖維素膜、非凝膠支持物、凝膠支持物和硅膠-G薄層等,分子生物學(xué)領(lǐng)域*常用的是瓊脂糖凝膠電泳。所謂電泳是指帶電粒子在電場中的運(yùn)動(dòng)。由于電荷和分子量不同,不同的物質(zhì)在電場中以不同的速度移動(dòng)。根據(jù)這一特點(diǎn),可以利用電泳對(duì)不同物質(zhì)進(jìn)行定性或定量分析。 ,或某種混合物用于成分分析或單成分提取制備,在臨
床試驗(yàn)或?qū)嶒?yàn)研究中具有極其重要的意義。電泳儀就是根據(jù)上述原理設(shè)計(jì)制造的。下面簡單介紹一下它的用法和注意事項(xiàng)。
如何使用
1、先用導(dǎo)線將電泳槽的兩個(gè)電極與電泳儀的直流輸出端連接起來,注意不要接反。
2、將電泳儀電源開關(guān)調(diào)至關(guān)閉位置,電壓旋鈕調(diào)至*小,根據(jù)工作需要選擇電壓電流量程。
3. 打開電源,緩慢轉(zhuǎn)動(dòng)電壓調(diào)節(jié)旋鈕,直到達(dá)到所需電壓,設(shè)置電泳終止時(shí)間,然后開始電泳。
4、工作完成后,轉(zhuǎn)動(dòng)旋鈕開關(guān)至零位或關(guān)閉狀態(tài),拔出電泳插頭。
預(yù)防措施
1、電泳儀通電進(jìn)入工作狀態(tài)后,嚴(yán)禁人體接觸電極、電泳等可能帶電的部位,也不得在電泳槽內(nèi)取放東西。如有必要,請(qǐng)先關(guān)閉電源,以免觸電。同時(shí)儀表必須有良好的接地端子,防止漏電。
2、儀器通電后,請(qǐng)勿臨時(shí)加拔輸出引線插頭,以防短路。雖然儀器裝有保險(xiǎn)絲,但短路仍可能對(duì)儀器造成損壞。
3、由于不同介質(zhì)支撐的電阻值不同,電泳時(shí)通過的電流量也不同,游泳速度和游到*后所需的時(shí)間也不同。因此,不同介質(zhì)載體的電泳不應(yīng)在同一臺(tái)電泳儀上同時(shí)進(jìn)行。
4、當(dāng)總電流不超過儀器額定電流(*大電流量程)時(shí),可多槽聯(lián)合使用,但注意不要過載,否則容易影響儀器壽命。
5、在某些特殊情況下,當(dāng)需要檢查儀器的電泳輸入時(shí),允許在穩(wěn)態(tài)下空載啟動(dòng),但在穩(wěn)態(tài)下,開機(jī)前必須連接負(fù)載,否則電壓表指針會(huì)大幅度跳動(dòng),容易造成不必要的人為損壞。
6、在使用過程中如發(fā)現(xiàn)異?,F(xiàn)象,如巨響、放電、異味等,必須立即切斷電源進(jìn)行維修,以免發(fā)生事故。
分析天平:
分析天平是定量分析工作中不可缺少的重要儀器。充分了解儀器的性能和熟練使用儀器是獲得可靠分析結(jié)果的保證。分析天平的種類很多,包括普通分析天平、半自動(dòng)/全自動(dòng)光電投影阻尼分析天平和電子分析天平。下面介紹電子分析天平的使用方法及注意事項(xiàng)。
操作方法
1. 檢查并調(diào)整天平至水平位置。
2、提前檢查電源電壓是否匹配(必要時(shí)配置穩(wěn)壓器),按儀器要求開機(jī)預(yù)熱至所需時(shí)間。
3. 充分預(yù)熱后開啟天平開關(guān)時(shí),天平會(huì)自動(dòng)調(diào)整靈敏度和零點(diǎn)。顯示穩(wěn)定標(biāo)志后,即可進(jìn)行正式稱重。
4、稱量時(shí),將干凈的稱量瓶或稱量紙放在秤盤上,關(guān)閉側(cè)門,輕按去皮按鈕,天平自動(dòng)校準(zhǔn)零點(diǎn),然后逐漸加入被稱量物質(zhì),直至達(dá)到要求重量達(dá)到。
5、被稱量物質(zhì)的重量為顯示屏左下角出現(xiàn)“→”符號(hào)時(shí)顯示屏上顯示的實(shí)際值。
6、稱量完畢后,應(yīng)及時(shí)取出稱量瓶(紙),關(guān)閉側(cè)門,切斷電源,登記使用情況。
預(yù)防措施
1、天平應(yīng)放在堅(jiān)固穩(wěn)定的水泥臺(tái)或木臺(tái)上。房間需要清潔、干燥和相對(duì)恒定的溫度。同時(shí),天平上應(yīng)避免直射光。
2、稱量時(shí)應(yīng)從側(cè)門取料,讀數(shù)時(shí)應(yīng)關(guān)閉門,防止氣流引起天平擺動(dòng)。前門僅用于維護(hù)或清 除殘留材料。
3、電子分析天平長期不使用時(shí),應(yīng)定期通電預(yù)熱,每周一次,每次2小時(shí),以確保儀器始終處于良好使用狀態(tài)。
4. 天平箱內(nèi)應(yīng)放置吸濕劑(如硅膠)。當(dāng)吸濕劑吸水后變色時(shí),應(yīng)進(jìn)行高溫烘烤和更換,以保證吸濕性能。
5、揮發(fā)性、腐蝕性、強(qiáng)酸、強(qiáng)堿物質(zhì)應(yīng)在帶蓋的稱量瓶中稱量,以防腐蝕天平。
2、通電前,根據(jù)工作電源的要求檢查電壓是否符合要求。如果電源波動(dòng)過大,應(yīng)在交流穩(wěn)壓后連接到儀器上。
3、電源應(yīng)布線良好,排除外界干擾。使用攪拌器時(shí),務(wù)必將攪拌器外殼連接到儀器的接地端。
4、打開儀器電源,預(yù)熱10分鐘后,即可進(jìn)行測量。